English
  • facebook
  • kiungo1
  • twitter3
  • YouTube3

Sababu zinazoamua ufanisi wa awali wa DNA

Katika usanisi wa DNA, RNA na asidi nucleic zisizo asilia, hatua ya Kuzuia na Kuunganisha ina jukumu muhimu.

Hatua ya Kupunguza Ulinzi ni kuondoa kikundi cha DMT kwenye usaidizi thabiti au kikundi cha 5' hidroksili kwenye nyukleosidi ya awali yenye asidi ya kikaboni, na kufichua kikundi cha haidroksili kwa hatua ifuatayo ya kuunganisha.Asilimia 3 ya asidi ya trikloroasetiki iliyo katika dikloromethane au toluini hutumiwa zaidi kutekeleza hatua ya kuzuia ulinzi.Mkusanyiko wa asidi ya trichloroacetic na wakati wa kuzuia (wakati wa kuzuia) hutawala usafi wa bidhaa za mwisho.Mkusanyiko wa chini na muda usiotosha wa kuzuia huacha kundi la DMT lisiloathiriwa, ambalo hupunguza mavuno na kuongeza uchafu usiohitajika.Muda mrefu wa uzuiaji unaweza kusababisha uondoaji wa mlolongo wa sanisi, na kutengeneza uchafu usiyotarajiwa.

Hatua ya Kuunganisha ni nyeti kwa maudhui ya maji ya vimumunyisho na unyevu wa hewa.Mkusanyiko wa maji katika awali unapaswa kuwa chini ya 40 ppm, bora chini ya 25 ppm.Ili kuweka hali ya usanisi isiyo na maji, usanisi wa asidi ya nukleiki unapaswa kufanywa katika mazingira yenye unyevunyevu wa chini, kwa hivyo tunapendekeza mteja wetu atumieVifaa vya Amidites vilivyoyeyushwa, ambayo inaweza kufuta Phosphoramidite ya unga au mafuta katika asetonitrile isiyo na maji ili kuepuka kuwasiliana na hewa.

Sababu zinazoamua ufanisi wa usanisi wa DNA5
Sababu zinazoamua ufanisi wa usanisi wa DNA4

Kwa kuwa mumunyifu wa phosphoramidites ni bora katika hali isiyo ya maji, na mitego ya Masi ili kunyonya maji ya kufuatilia kwenye vitendanishi na amidite, inahitajika kuandaaMitego ya Masi.Tunapendekeza 2 g kwa chupa za vitendanishi vya 50-250ml, 5g kwa chupa za reagent 250-500ml, 10g kwa chupa za reagent 500-1000ml, na 20g kwa chupa za reagent 1000-2000ml.

Kuyeyushwa kwa phosphoramidites kunapaswa kufanywa chini ya anga ya ajizi, na uingizwaji wa vitendanishi vya activator na acetonitrile inapaswa kumalizika kwa wakati.Vitendanishi vya Capping na Oxidation vinapaswa kutumika haraka iwezekanavyo, vitendanishi vilivyofunguliwa vinatoa maisha ya rafu kidogo, na shughuli kidogo wakati wa usanisi.

Muda wa kutuma: Aug-09-2022