Bodi zinazolingana | 1, 3, 5, 8. |
Uchujaji | pigo filtration, suction filtration |
Idadi ya bandari za sindano | 5, 6, 7, 8, 9, 10. |
Aina za sahani zinazolingana | Sahani ya C18, sahani ya kisima kirefu, sahani ya syntetisk (inayoendana na sahani nyingi za syntetisk), sahani ya microtiter |
Moduli | mhimili mmoja au mhimili mbili |
Voltage | 220V |
Udhamini | 1 mwaka |
Desturi | Imekubaliwa |
1. Gel Electrophoresis Utakaso wa Chromatography
Matumizi denaturing Polyacrylamide gel electrophoresis kromatografia kwa ajili ya utakaso.Wakala wa denaturing kwa ujumla ni 4M formamide au urea 7M, mkusanyiko wa acrylamide ni kati ya 5-15%, na uwiano wa methacrylamide ni kati ya 2-10%.
Baada ya electrophoresis, nafasi ya bendi ya asidi ya nucleic inahitaji kuamua chini ya mionzi ya mwanga wa ultraviolet, gel iliyo na lengo la asidi ya nucleic hukatwa, asidi ya nucleic hupigwa na kuvuja, na kisha suluhisho la leaching limejilimbikizia, limetolewa; quantified na lyophilized.
2. DMT-Imewashwa, Utakaso wa HPLC
Chagua hali ya DMT-On wakati wa usanisi, bidhaa ghafi iliwekwa katikati na kujilimbikizia kwenye joto la kawaida ili kuondoa amonia iliyozidi baada ya uchanganuzi wa amino.
Utenganisho ulifanywa kwa kutumia safu wima ya C18 yenye asetonitrile na 10% ya asidi ya triethylamine-asetiki (TEAA) kama kielelezo.Baada ya kumaliza kukamilika, hujilimbikizia, na kisha kikundi cha DMT kinaondolewa na asidi ya trifluoroacetic.Baada ya neutralization, baadhi ya chumvi na molekuli ndogo huondolewa kwa njia ya bomba iliyokatwa, na hatimaye hutolewa.
Njia hii inaweza kupata bidhaa na usafi wa juu, lakini ni muhimu kulipa kipaumbele kwa tukio la uharibifu.
3. DMT-Zima, HPLC Utakaso
Chagua DMT-Off wakati wa usanisi, na bidhaa ghafi ilikuwa katikati na kujilimbikizia kwenye joto la kawaida ili kuondoa amonia ya ziada baada ya amonia.
Utenganishaji ulifanywa kwa kutumia safu wima ya C18 yenye asetonitrile na 10% ya asidi ya triethylamine-asetiki katika maji kama rahisi.Baada ya kujitenga kukamilika na kuhesabiwa, aliquots ni lyophilized.
Njia hii inahitaji marekebisho makini ya hali ya utengano, na inaweza pia kupata molekuli safi kiasi.